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腺病毒(ADV)包装

腺病毒
Adenovirus
 

腺病毒(adenoviruses (AdVs)是具有双链DNA基因组的无包膜二十面体病毒。自1953年发现以来,已在人类、哺乳动物、鸟类、鱼类和爬行动物中鉴定出120多种物种特异性腺病毒血清型〔1〕。

其中基于人腺病毒5型(Ad5)改造的载体使用较为广泛,其特点是人为地删除了E1和E3基因,导致腺病毒失去复制能力和一定程度上降低免疫原性,使得Ad5成为一种广泛、安全、有效的基因运输载体。

最常用的腺病毒包装体系有 AdEasy 和 AdMAX 两种,其共同特点是目的基因首先克隆到穿梭载体,再重组到腺病毒的大骨架上。以上两个系统均具有腺病毒早期转录复制基因 E1 和 E3 的缺陷(ΔE1,ΔE3),其中 E3 基因对病毒的产生并非必需。因此,腺病毒包装必需依赖表达 E1 的细胞系,例如 HEK-293,HEK-293A 等。

腺病毒结构以及基因组

 

包装流程

 

腺病毒包装流程(素材来源:BioGdp
 
腺病毒的两种包装系统怎么选择?
需要根据自己实验室的经验以及需求进行选择。
(1)AdEasy 系统:操作步骤相对可控,AdEasy 系统得到的病毒滴度相对较高。AdEasy 系统是较常用的系统,在 BJ5183 感受态中完成环状腺病毒基因组的重组,将重组腺病毒基因组经PacI 酶切线性化后转染 293A 细胞。但重组腺病毒基因组的阳性率比较低,需要挑选大量的克隆进行验证。
(2)AdMax 系统:是直接将穿梭质粒和骨架质粒导入到包装细胞 293A 中,重组过程不可控,中间无法进行筛选,所以重组假阳性较高,筛选阳性结果的难度较 AdEasy 系统高很多。 但 AdMax 包装系统流程更简便易操作,适合新手研究人员。

服务优势
     公司专注于病毒包装服务,提供AAV(腺相关病毒)、LV(慢病毒)、ADV(腺病毒)、逆转录病毒等多种病毒载体的一站式服务,服务涵盖设计、合成、病毒包装与纯化---稳定可靠、全程无忧。

 

服务产品

 

动物级腺病毒

引用文献:

1 Kulanayake S, Tikoo S K. Adenovirus Core Proteins: Structure and Function. Viruses, 2021, 13(3): 388

2 JT S, M H, WAM B, et al. Adenoviral vectors for cardiovascular gene therapy applications: a clinical and industry perspective. J Mol Med (Berl), 2022, 100(6): 875~901

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