CRISPR/Cas9
CRISPR/Cas9系统是一种强大的基因编辑工具，主要用于基因敲除和基因敲入，操作步骤包括设计gRNA、导入Cas9酶和进行DNA修复。广泛应用与生物技术以及医学领域。
我们可为体外和体内基因组编辑提供多种类型的CRISPR产品和服务。我们可提供包括质粒载体、病毒、细胞稳转株等多种CRISPR现货产品以满足多样的实验需求。
亮点：
- 量身定制：根据您的实验需求，配置专业技术人员为您个性化的为您设计CRISPER载体 。
- 广泛应用：可提供从实验方案设计到稳转细胞株筛选的全方位服务
- 专业支持：我们的产品服务质量优异、周期短、配备专业的技术支持人员。
产品服务：
CRISPER载体
Geneadv具有丰富的Cas9载体、gRNA载体以及用于CRISPRa/i载体的辅助载体，以E. coli甘油菌形式可立即发货。
CRISPER病毒
Geneadv可提供极高质量的 病毒包装服务， 可实现对难转染细胞的高效CRISPR打靶。我们专有的病毒包装技术确保了包装的病毒具有更高的滴度、纯度、活性和一致性。
AAV ：>1012 vg，多种重血清及启动子可供选择。
慢病毒：科研级包装>108 TU/ml 。
腺病毒：科研级包装>1011PFU,含动物级腺病毒可供选择
CRISPER CRO服务
定制CRISPER服务：我们提供CRISPER文库的设计，克隆及包装等服务，还可根据需求进行体外功能性筛选。
细胞稳转株：可提供CRISPER技术进行敲除，敲入和点突变等稳转细胞株的构建，并提供RT-qPCR结果验证。
预制细胞稳转株：可提供各种类型的Cas9表达细胞株的预制并进行功能性验证，可直接用于功能性研究和高通量筛选。
原理：
1.靶向识别：gRNA与目标DNA序列互补配对，确保Cas9蛋白能够准确识别目标位置。目标DNA序列的3'端需要有特定的PAM序列（通常为5'-NGG-3'），这是Cas9蛋白识别和切割的关键。
2.DNA切割：Cas9蛋白在gRNA的引导下，切割目标DNA，产生双链断裂（DSB）。这一过程是基因编辑的基础，细胞会启动修复机制来修复这些断裂。
3.DNA修复：细胞修复双链断裂的方式主要有两种：
（1）NHEJ（非同源末端连接）DNA修复途径，该途径容易出错并在DSB位点产生插入/缺失（Indels），导致移码或提前终止密码子；
（2）HDR（同源定向修复）途径，该途径寻找同源DNA序列，并在找到一个后引发同源重组，且错误率较低。由于Cas9作为通用内切酶发挥作用，唯一需要的是gRNA，它可以化学合成、体外转录或细胞内表达以提供特异性（图1）〔1〕。
图1 CRISPR-Cas9 system原理图〔2〕
CRISPR-Cas9基因编辑技术主要有两种应用方式：
1. 基因敲除（Knockout）：通过CRISPR-Cas9在目标基因上引入双链断裂（DSB），细胞通过非同源末端连接（NHEJ）修复机制修复断裂，过程中可能引入插入或缺失（indels）突变，导致目标基因功能丧失。
2. 基因插入或替换（Knockin）：利用同源重组（HDR）机制，在目标基因上引入特定的突变或外源序列。这需要提供一个含有所需改变的同源模板DNA，细胞利用该模板通过HDR修复DSB，实现精确的基因编辑〔3〕。
联系我们
我们为您提供 CRISPR/Cas9系统技术服务，如有需求请联系我们，电话：0512-63378233 邮箱：ga001@geneadv.com
参考文献
1.CRISPR-Cas9 system: A new-fangled dawn in gene editing. Life Sciences, 2019, 232: 116636
2..Das J, Bhatia P, Singh A. CRISP Points on Establishing CRISPR-Cas9 In Vitro Culture Experiments in a Resource Constraint Haematology Oncology Research Lab. Indian J Hematol Blood Transfus, 2019, 35(2): 208～214
3.Ma Y, Zhang L, Huang X. Genome modification by CRISPR/Cas9. FEBS J, 2014, 281(23): 5186～5193
