GA 化学修饰 ASO 是小核酸药物之一的反义寡核苷酸(antisense oligonucleotides)英文缩写,基于目前研究结果表明,ASO 降解 RNA 是通过单链 ASO 直接结合 RNA 在 RNaseH 作用下降解 RNA。 GA 化学修饰ASO 是特殊化学修饰的一段长 20bp 的单链 DNA-RNA Chimeras,即用型。对合成的 ASO 进行一系列化学修饰以提高 ASO 的稳定性,降低细胞毒性。适合动物体内干扰实验和细胞实验。
GA 化学修饰 ASO 是小核酸药物之一的反义寡核苷酸(antisense oligonucleotides)英文缩写,基于目前研究结果表明,ASO 降解 RNA 是通过单链 ASO 直接结合 RNA 在 RNaseH 作用下降解 RNA。 GA 化学修饰ASO 是特殊化学修饰的一段长 20bp 的单链 DNA-RNA Chimeras,即用型。对合成的 ASO 进行一系列化学修饰以提高 ASO 的稳定性,降低细胞毒性。适合动物体内干扰实验和细胞实验。
腺病毒作为一种广泛应用于基础与临床前研究的病毒载体,具有宿主范围广、感染效率高、外源基因承载容量大、不整合宿主基因组等特点,已成为基因功能研究、疫苗开发及基因治疗等领域的重要工具。本手册提供关于基安生物腺病毒在动物实验中规范操作的全流程指导,涵盖从病毒准备、动物感染、样本采集到安全处置等关键环节。
基安生物使用的是第三代慢病毒高效率包装系统,具有很高的安全性(将 gag, pol 和 rev基因分别克隆到了不同质粒中,且互相之间没有任何同源序列,大大降低了复制型慢病毒的产生几率;去掉了 tat transact tivation 基因,使其成为“自杀”性病毒)。
慢病毒可以高效感染干细胞、神经细胞、肝细胞、心肌细胞、内皮细胞、原代细胞、不分化细胞等多种不易转染的细胞,可以将外源基因有效地整合到宿主染色体上,从而达到持久性表达,在科研领域和基因治疗领域均具有广阔的应用前景。慢病毒载体(Lentiviral vector, LVs)是以人类免疫缺陷型病毒I型(HIV-1)为基础发展起来的基因治疗载体,通过删除了与病毒包装和转导相关的基因,以及将HIV包装和生产所需的病毒序列与编码病毒蛋白的序列分开,使产生的慢病毒颗粒是复制缺陷型的,只具有感染靶细胞的能力,而无法在靶细胞中进行大量复制,具有很高的生物安全性。
GA miRNA agomir
是特殊化学修饰的 miRNA 激动剂,适用于细胞实验、动物体内实验,即用型;属于 GA miRNA mimic 的升级产品,与 mimics 相比,Agomir 与细胞膜亲和力更高,适合动物体内实验,且在体内实验中具有更高的稳定性和过表达效果,可采用全身注射或局部注射等多种方式给药,操作简便。
GA miRNA antagomir
是特殊化学修饰的 miRNA 拮抗剂,适用于细胞实验、动物体内实验,即用型。属于 GA miRNA inhibitor 的升级产品,与 miRNA inhibitor 相比,antagomir 与细胞膜亲和力更高,适合动物体内干扰实验,并且在体内实验中具有更高的稳定性和抑制效果,可采用全身注射或局部注射等多种方式给药,操作简便。
GA 化学修饰 siRNA
作用机制基于目前研究结果表明是通过 Dicer 解链 siRNA 双链结构,反义互补RNA 单链再利用 AGO2 和其他蛋白形成沉默复合体(RISC)对目标 RNA 进行降解。GA 化学修饰 siRNA 是特殊化学修饰的一段长 21 个核苷酸的双链 RNA,即用型。对合成的 siRNA 进行一系列化学修饰以提高 siRNA的稳定性、降低脱靶效应。适合动物体内干扰实验,并且在体内实验中具有更高的稳定性和抑制效果,可采用全身注射或局部注射等多种方式给药,操作简便。
GA 化学修饰 ASO
是小核酸药物之一的反义寡核苷酸(antisense oligonucleotides)英文缩写,基于目前研究结果表明,ASO 降解 RNA 是通过单链 ASO 直接结合 RNA 在 RNaseH 作用下降解 RNA。 GA 化学修饰 ASO 是特殊化学修饰的一段长 20bp 的单链 DNA-RNA Chimeras,即用型。对合成的 ASO 进行一系列化学修饰以提高 ASO 的稳定性,降低细胞毒性。适合动物体内干扰实验,并且在体内实验中具有更高的稳定性和抑制效果,可采用全身注射或局部注射等多种方式给药,操作简便。
AAV 病毒载体是极具应用前景的基因给药工具。野生 AAV 被认为是非致病性的,感染个体后产生的免疫应答水平极低,无法自行复制,需依赖于与腺病毒或疱疹病毒的共同感染才能复制。重组 AAV 载体自身只需携带一个顺式元件,ITR,就能生产出重组 AAV 颗粒。由于缺乏 Rep 基因,重组 AAV 病毒基因组不整 合宿主基因组,以染色体外形式长期存在,在非分裂细胞(如肌细胞)中也能实现治疗性蛋白的持久表达,安全性极高。另外,多种血清型 AAV 对肌细胞具有良好嗜性。
慢病毒载体因其能够高效转导分裂与非分裂细胞、稳定整合外源基因至宿主基因组、承载较大目的片段及免疫原性低等优势,已成为基因功能研究、稳定细胞株构建、CRISPR筛选及基因治疗领域中最核心的工具之一。本手册旨在为研究人员系统提供慢病毒质粒包装的全流程规范指导,涵盖从质粒设计、共转染、病毒收获、浓缩纯化到滴度检测及安全使用的关键环节。
慢病毒感染是目前最常用于构建稳转细胞系的方法之一。本试剂盒基于第二代慢病毒包装系统,提供了慢病毒转染辅助质粒(pGA plasmid Premix)、表达 GFP 的阳性对照质粒以及高效的转染试剂。操作者只需自备携带目的基因的慢病毒转移质粒即可快速高效地完成慢病毒包装实验。
本产品是基于胶体金侧向层析技术的 HIV-1 P24 蛋白半定量检测卡,可以用于相关慢病毒载体和假病毒包装效率的快速评估(P24 蛋白是慢病毒外壳中含量最大的标志性蛋白)。
Bulge-Loop miRNA qRT-PCR 是一种常用的 miRNA 表达量的检测方法,基于特异性的茎环状 RT 引物进行 RT 反应,再结合特异性的正向引物进行 qPCR 检测,具有很高的灵敏度和特异性,确保反应不受其前体及其他因素干扰;序列高度同源的 miRNAs 也可精确区分;。该方法采用 SYBR Green 染料检测。