巨噬细胞(Macrophages)是一种位于组织内的白血球,源自单核细胞,而单核细胞又来源于骨髓中的前体细胞。巨噬细胞和单核细胞皆为吞噬细胞,在脊椎动物体内参与非特异性防卫(先天性免疫)和特异性防卫(细胞免疫)。巨噬细胞根据其表型和细胞因子分泌分为两种类型:M1 巨噬细胞,表现出促炎和有害作用,以及 M2 巨噬细胞,显示抗炎和修复功能。
巨噬细胞(Macrophages)是一种位于组织内的白血球,源自单核细胞,而单核细胞又来源于骨髓中的前体细胞。巨噬细胞和单核细胞皆为吞噬细胞,在脊椎动物体内参与非特异性防卫(先天性免疫)和特异性防卫(细胞免疫)。巨噬细胞根据其表型和细胞因子分泌分为两种类型:M1 巨噬细胞,表现出促炎和有害作用,以及 M2 巨噬细胞,显示抗炎和修复功能。
内皮细胞,也称为血管内皮细胞(Vascular Endothelial cells,VECs),是位于血液与血管组织之间的一种单层扁平上皮细胞,细胞形态呈多边形,衬贴在心脏、血管和淋巴管等血管内表面。目前,心血管疾病仍然位居全球死因首位,内皮细胞(Endothelial cells,ECs)在这些疾病中扮演着重要角色,尤其在冠状动脉疾病和脑卒中疾病中。此外,由于内皮细胞参与血管的生成,其对肿瘤的生长也至关重要。因此,在体外、体内实现内皮细胞的高效与特异性基因表达调控、开发高效靶向内皮细胞疗法就显得尤为重要。
不同 AAV 血清型对组织有其天然亲和力,不同血清型对皮肤各类细胞的亲和力存在显著差异,需根据靶细胞类型进行筛选,目前研究表明,经改造或天然存在的某些 AAV 血清型对皮肤组织展现出潜力。AAV5 和 AAV8 对表皮层(尤其是角质形成细胞)显示出较高的转导效率,是真皮感染的有效工具。
在 AAV 介导的基因表达过程中,启动子发挥着关键作用,它决定了基因表达的细胞类型与特异性。为了更好的实现肌肉组织的精准递送,选择前列腺启动子非常关键。目前的研究表明,除了除了广谱启动子 CMV、 CAG 外,还有前列腺癌细胞特异性启动子 DD3,差异显示代码 3(DD3)是一种在 PCa 组织中高度表达的非编码基因,在正常前列腺组织或其他肿瘤组织中几乎不表达,可以作为前列腺癌基因治疗的精确靶标。
在眼科治疗领域,重组腺相关病毒(rAAV)可通过视网膜下注射(subretinal injection)、玻璃体腔注射(intravitreal injection)及脉络膜上注射(suprachoroidal injections)三种常见给药途径递送至视网膜。
AAV 载体对胰腺的转导效率优于腺病毒与慢病毒载体。单链 AAV 载体的 8 型和 9 型(AAV8、AAV9)在系统性给药、胰腺内给药、导管内给药或经胰腺内血管给药时,对胰腺外分泌部与内分泌部均具有较强转导效率。
腺病毒(Adenovirus,AV)是一种线性双链DNA无包膜病毒,对分裂期细胞和非分裂期细胞均具有感染能力,且具有嗜上皮细胞性。目前常用的重组腺病毒载体是基于人腺病毒5型(Ad5)为基础发展起来的工具病毒载体,它可通过受体介导的内吞作用进入细胞内,但腺病毒基因组不整合进入宿主细胞基因组中。
腺病毒(Adenovirus,AV)是一种线性双链DNA无包膜病毒,对分裂期细胞和非分裂期细胞均具有感染能力,且具有嗜上皮细胞性。目前常用的重组腺病毒载体是基于人腺病毒5型(Ad5)为基础发展起来的工具病毒载体,它可通过受体介导的内吞作用进入细胞内,但腺病毒基因组不整合进入宿主细胞基因组中。
LC3(light chain 3)简称于MAP1LC3(microtubule-associated proteins light chain3)是目前公认的自噬标记物。哺乳动物的LC3与酵母中自噬相关蛋白Apg8/Aut7/Atg8具有同源性。LC3蛋白合成后羧基端被Atg4剪切,暴露甘氨酸残基,产生细胞浆定位的LC3-I。 在自噬过程中,LC3-I会被包括Atg7和Atg3在内的泛素样体系修饰和加工,与磷脂酰乙醇胺(PE) 共价结合,形成LC3-II并定位于自噬体膜上。哺乳动物中的LC3可分为三种: LC3A、LC3B和LC3C。其中,LC3B作为LC3的一种,同样可以用作自噬的分子标志。
腺病毒(Adenovirus,AV)是一种线性双链DNA无包膜病毒,对分裂期细胞和非分裂期细胞均具有感染能力,且具有嗜上皮细胞性。目前常用的重组腺病毒载体是基于人腺病毒5型(Ad5)为基础发展起来的工具病毒载体,它可通过受体介导的内吞作用进入细胞内,但腺病毒基因组不整合进入宿主细胞基因组中。
腺病毒作为一种常用的基因操作工具,在心血管领域、肝脏、肌肉、肺、肿瘤及其他领域广泛应用。
肥胖、高血压、2 型糖尿病、心血管疾病及胰岛素抵抗等疾病的发生,均与脂肪组织代谢紊乱存在关联。因此,运用先进技术开展靶向脂肪组织的研究,对于深入理解脂肪功能及代谢具有重要意义。腺相关病毒(AAV)作为基因靶向递送的重要载体,自然成为研究脂肪组织相关基因功能及代谢调控的有效工具。然而,要借助 AAV 在脂肪组织中实现精准、高效的基因操作,研究者需审慎考量三个关键环节:血清型的选择、启动子的特异性以及递送
途径的优化。